27．グリセリン筋の収縮

[目的］グリセリン筋を用いて、ATPを加えると筋収縮が起こることを確かめ、筋肉運動とエネルギーの関係について理解を深める。
［器具・材料］
　１％ATP溶液（アデノシン三リン酸）　洗浄液　試験液
グリセリン筋
［準備および操作］
１)グリセリン筋を作る。
２)グリセリン筋を洗浄液に入れ、筋肉をほぐしスライドガラス上に取る｡
３)試料に試験液を１〜２滴落とし、２〜３分後ろ紙で吸い取って筋繊維の長さを測定する。
４)ATP溶液を少量滴下し、収縮した筋繊維の長さを測定する。
[留意点・工夫点]
＊グリセリン筋の作り方
　
  • 鶏のささみ（新鮮なもの）を５〜６cmに裂いたものの両端を伸ばして割り箸などに固定する。鶏のささみのほかにカエルの足でもよい。（部位はささみに限らない)
　
  • 50%グリセリン溶液に浸して冷凍庫で３日〜１週間保存する｡途中２回程度液を替える。 作成したものはグリセリン液中で数ｹ月冷凍保存できる。
＊洗浄液・試験液の作り方
　A液：pH７のホウ酸緩衝液
B液：塩化マグネシウム22.4g＋純水1000ml
C液：塩化カリウム10g＋純水100ml
　
　洗浄液　　　A液1000ml ＋B液132ml +C液2ml
　試験液　　　A液100ml ＋B液8ml ＋C液1ml
＊ATP溶液は1週間程しか持たないので少量ずつ作る。実験時はエッペンドルフに入れて配ると少量でとりやすい。１時間の実験には１ml以下の量で充分である。
＊筋繊維は糸状にほぐし、そのまま測定できる大きさにする。
＊筋繊維の長さの測定はスライドガラスの下に方眼紙を置くとよい。顕微鏡でミクロメーターを使って測定する方法もある。このときは覗きながらATP溶液を滴下する。
＊横紋の観察もできる。観察するにはよくほぐした筋繊維束を取り、メチレンブルーをかけ、高倍率で観察する。